大分子可用电子显微镜直接观察,样品制备有许多技术

大分子可用电子显微镜直接观察,样品制备有许多技术
   电子显微镜  大分子可以用电子显微镜直接观察，样品制备有许多技术，这里介绍两种。
  观察核酸的常用方法是展开技术，核酸分子比任何蛋白质分子都要大得多，把核酸分子包埋在一层蛋白质膜中，于是它就襄上一层蛋白质分子，如图所示，蛋白质分子起两个作用：
  1、它们使核酸分子伸展开来，原因如下，如果反悔很小体积的蛋白质溶液铺到离子溶液表面，蛋白质分子会展开形成蛋白质单层薄膜，如果核酸分子在蛋白质溶液中，它们也随蛋白质膜扩展面伸展开来，核酸分子的伸展使得整个分子清楚可见，不至于象在没有伸展情况下看到的那种缭绕和分子间聚集。  2、蛋白质在核酸分子上形成一层厚的覆盖层，这覆盖层使核酸分子容易看得见，为了观察清楚还需要其他一些东西，因为仅含小原子的分子对电子通常是近乎透明的，因此，为了使核酸分子可见，覆盖的蛋白质层的分子还得涂上一层重金属，这可以将铂原子 或沉积在蛋白质涂层上，称为染色，这些重原子是电子良好吸收物，而背景支持物相对地很少吸收电子，因此，这引起金属离子提供了图像的反差，在对于分子的长度和线状拓扑结构感兴趣而想观察很长分子时，投影和染色是很有用的技术。
  如果用刚才所讲的蛋白质单层技术还不容易看清楚 ，或是在对所研究分子的形状和表面细节感兴趣时，可以用另一种方法分子， 这就是负反差技术。例如，蛋白质分子如果包埋在蛋白质膜中，就无法看到，对此另一种可选择的方法是涂一层非常薄的金属原子，如果这些原子很小，涂层也只有一二个原子厚，那么这些原子就会沿着粒子的外形排列，这可以用很少量的原子染色，但是更方便的是用负反差技术，这种技术是观察的蛋白质分子或病毒粒子与磷钨酸，或盐溶液混合，两者都含有强烈吸收电子的原子，然后将溶液滴涂在支持膜上，含有所研究的大分子或粒子的微滴便在支持膜上干燥，微滴上有大分子在处有金属离子的厚度比其他地主要薄，把样品放在电子束中时，穿过微滴大分子区域的电子就多些，这样就可得到一些或小的病毒粒子的负像，用这各方法观察到手病毒粒子和蛋白质分子的电子显微镜照片。