激光共焦荧光显微镜的分辨率以及物镜的选择

激光共焦荧光显微镜的分辨率以及物镜的选择
　　分辨率显示了显微镜分辨两个物体或者一个物体中的两个点的能力。分辨率通常是指图像中两个物点之间被视为两个独立的对象进行分辨的最低距离。在光学显微镜下，如果样品的两个物体接近于分辨率，它们在光学显微镜下会变得模糊起来，这时则不能区分出是两个相对独立的物体。分辨率越高，越容易将两个物体区分开。
　　光学图像的分辨率受到被观察样品波长的限制。这是由于当物体尺寸远小于光的波长时，物体不能被观察到。常用的激光波长范围在350～550nm，因此激光共焦荧光显微镜的分辨率低于扫描电子显微镜和透射电子显微镜。激光共焦荧光显微镜的最高分辨率为200nm，这意味着当样品中的两点距离在200nm附近的时候可以被区分开。
　　放大率与分辨率是不同的，放大率是指对物体放大的程度，高的放大率并不能增加图像的分辨率，它仅仅是指将物体放大，一旦物体接近200nm，将仍旧被看成一个点：
　　总放大率一物镜放大率×目镜放大率
　　例如，当选用的物镜放大率为40倍，目镜的放大率为10倍时，总放大率为400倍。在此放大倍数下，激光共焦荧光显微镜观察到1μm的物体有0．4mm大。