液体培养基来提取染色体DNA、RNA或酶

液体培养基来提取染色体DNA、RNA或酶
  抱子悬液有多种用途：可用于接种液体培养基来提取质壶或染色体DNA、RNA或酶，制备原生质体；筛选突变体，用来在杂交中进行重组分析和质粒转化。以20％甘油悬浮液贮藏在一20℃的孢子，即使经多次取样仍可存活几年(但是也有例外，如不产孢子的秃型突变株和某些淡青链霉菌的链霉菌素敏感菌株)。    制备孢子悬液简单的步骤如下：从已经长好孢子的固体培养物上刮取孢子，悬于水中，用棉花过滤以除去菌丝片段和固体培养基碎片后，离心得到孢子沉淀。离心也可除去培养基中的可溶性成份(这些成份中包括生长因子，它们会影响营养缺陷型标记的选用，或包括一些可降低孢子寿命和抑制孢子萌发的“腐化。物质)。    材料    生物材料：长有新鲜菌株的斜面或平板．    溶液、化学试剂等：无菌水，20％甘油(高压灭菌)。    小仪器：接种环，吸管，用于过滤的装有脱脂棉的试管(见图1)'离心管；旋盖小瓶(7．5ml和20m1)。    仪器设备：混合振荡器，台式离心机。    试验步骤    *1．在斜面或平板上加入9ml无菌水o    2．用接种环刮取培养物表面的孢子，首先轻轻地，然后逐渐用力刮，以使孢子悬浮。    3．将此粗制的孢子悬液倒入离心管中，并在振荡器上尽可能地激烈振荡1分钟左右o    4．用装有脱脂棉的试管过滤悬液。    ·    5．将滤液倒入离心管中，3000转／分离心5—10分钟以使孢子沉淀。    ·6．停止离心后，马上倒掉上清液。    ·7．将离心管在振荡器上振荡几秒钟，使孢子沉淀物分散于残