培养的基本技术悬浮细胞实验荧光显微镜

培养的基本技术悬浮细胞实验荧光显微镜

培养的基本技术    设备、试剂，血清和培养基：开展组织培养工作需要一些特殊的设备和试剂，还需要血清和培养基。培养箱(特别是二氧化碳培养箱)，无菌室、或者超净工作台，光学显微镜，特别是倒置显微镜，各种规格的培养瓶，包括无钾玻璃的或无毒塑料的，封闭式的或螺口式的，是最基本的设备。
    悬浮细胞原代培养法：待培养的组织或瘤块经漂洗和挑选后先用刀具剖碎，再将这些碎片放置在无钙无镁(此种情况下细胞间的粘附力会下降)但含有蛋白酶(如胰酶、胶原酶、蛋白酶)或螯合剂的溶液中温育使之部分分散为细胞悬液。    酶或螯合物的工作时间，工作浓度及温度等则因组织而异。将由此所获得的细胞以一定的数量移植至培养瓶内，静置30分钟至24小时不等以俟其贴附在容器的底面上。细胞增殖到一定数量即可将之转移到另一培养瓶以试图传代。悬浮细胞原代培养法的最大优点在于可以同时进行双份培养以便于对照，但因刚经过胰酶处理的细胞易于凝集，．故此时的细胞计数未必可靠。