在光学显微镜下识别真菌的微小结构

在光学显微镜下识别真菌的微小结构    由于真菌染色体微小和染色技术上的困难，致使在光学显微镜下研究真菌染色体进展缓慢。同一种真菌，不同的研究者报道的染色体数目差别悬殊。如酿酒酵母，    1．微小的染色体和复杂的真菌核体：真菌的细胞核比其他真核生物的细胞核都要小，一般直径为2—3微米，而高等植物则在5—20微米之间。例如酵母菌的染色体小到和大肠杆菌的大小差不多，在光学显微镜下是不可识别的微小结构。    许多真菌细胞分裂时核膜不消失，染色体在核膜内分散性能差；典型的中期板又很难被发现，，终变期和中期是比较容易染色的，但它们却往往成团；有的真菌分裂前中期染色体首尾相连；有的真菌细胞核发生部分穿孔现象，部分染色质溢至细胞质，这些特点都为真菌的核型分析和染色体研究带来困难。    2．显微染色技术的困难和改进：    (1)铁矾—苏木精染色方法是研究真核生物细胞核和染色体经典方法。可是用该方法染色真菌的细胞核，在许多情况下只有核仁被染上颜色，染色质却难染上色，致使在相当长的时间内把某些真菌的核仁当成细胞核，使真菌细胞核学的研究走过了一段曲折的路程。    铁矾—苏木精对真菌细胞核染色的效果主要取决于固定剂的性质。如果用含有甲醛或氨化汞的固定剂固定真菌的细胞，用铁矾—苏木精染色，染色质就完全染不上颜色，核仁周围就是一个五色透明的亮区。改变固定剂的性质，或改用铬—锇酸等混合物固定，则核仁和染色质皆可被染上颜色，就不会把分裂期有规律变化的核仁与染色体混为一谈。    (2)Feulgen染色法是研究分裂期细胞核的有效方法，但用于真菌细胞核染色的效果却很差。某些真菌分裂期的细胞核，由于DNA含量低，或者由于水解过程中染色质强烈地散开，或者有些真菌的细胞核被证明是常染色质的，异染色质含量较少，可能导致Feulgen染色效果较差。