大多数酵母载体都是能穿梭于酵母和细菌之间

  作者:厂家库小编SWEU    2020-03-06    阅读:493

大多数酵母载体都是能穿梭于酵母和细菌之间
    培养酵母菌既简单、经济,又十分快捷,在营养丰富的培养基中,大约90min的时间即可增殖一代。
    支持酵母菌染色体功能的三种基本结构元件已经被确认和克隆,它们分别是复制起点(ARS元件)、着丝粒(CEN元件)和端粒(telomere,TEL)。已经利用这些克隆化的元件构建了酵母人工染色体,并应用于各种染色体行为的研究。利用这些结构元件,再加上克隆化的酵母菌选择标记与大肠杆菌载体融合构建成穿梭载体,能分别在大肠杆菌和酵母菌中自主复制并稳定存在。
    大多数酵母载体都是能穿梭于酵母和细菌之间的穿梭载体。根据不同用途,可分为克隆载体、表达载体、转导载体和用于诱变的载体。根据复制方式,酵母载体也可分为两类。一类是整合载体,这种载体在酵母中不能自我复制,只能通过同源重组整合到染色体中而得以保存。这类载体的优点是某个基因一旦被克隆和整合之后,将随染色体DNA而分离。因此该基因在细胞分裂时会更稳定。另一类载体(它包括酵母着丝点序列),一般在克隆时作为一个CEN/ARS盒,这类载体同时具有自我复制能力并且在细胞分裂时较稳定。    酵母分子生物学研究中常常要分离质粒和酵母染色体DNA,质粒DNA用来转化大肠杆菌,而染色体DNA则用于Southern杂交分析、PCR扩增和整合性质的质粒的克隆等。下面分别介绍酵母细胞质粒DNA和染色体DNA的分离方法。

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