酵母核孔复合物的组装-免疫细胞化学、电子显微镜

酵母核孔复合物的组装-免疫细胞化学、电子显微镜

　　核孔复合物的组装
　　在高等的真核生物中，核孔复合物(nuclear pore complex)是一个巨大的大分子集合，它含有接近100种不同的蛋白质，组装后的分子质量超过了120 MDa。在酵母中，这一集合比较简单，只有不到30种不同的多肽形成复合物。脊椎动物的核孔变大可能反映了随着后生动物的进化，复杂性的相应增加。但是酵母和高等真核生物中的核孔复合物的基本结构类似，这就表明它们之间可能存在着相同的移位机制，这使得人们能在单一的框架下研究这一问题。
　　核孔复合物中的蛋白质称为核孔蛋白(nucleoporin)或“nups”。随着Ran、输入蛋白和其他输入蛋白质的作用在最近的十年里被逐步揭示出来，研究的重点已经转移到核孔复合物的结构和组织上。电子显微镜显示核孔复合物是一个对称的集合，在中心有一个孔，对多数蛋白质来说，这是一个障碍。核孔复合物(NPC)贯穿核膜的双层膜，是细胞质和核仁间大分子流动的通用门户。NPC的基本框架包括一个中心孔和辐状结构。中心环上长约50～100 nm的纤维延伸至核质和细胞质，而整个NPC则通过核纤层锚定在膜上。
　　对核孔的组织结构的阐明源于对酵母中该复合物的研究。在酵母中，遗传的可塑性以及基因组的测序发现了30种核孔蛋白，而这些蛋白质在种系内是保守的，这就有利于在后生动物内的真核生物中进行同源鉴定。一旦鉴定出来，核孔蛋白就可以进行克隆并通过免疫细胞化学、电子显微镜和交叉研究将其定位在膜上。