高精确度酶促反应过程实验-分析图像显微镜

高精确度酶促反应过程实验-分析图像显微镜
根据相对误差的观点，如果反应初期某一定时间内底物发生1％的变化，要反映底物从100到99的变化，只有用高精确度的方法才有可能；相反，要检出从0到1的变化则十分容易，不过方法的灵敏度必须比测定底物者高100倍。但是，如果产物是一种易于发生进一步变化的不稳定物质，此时则以测定底物的减少为佳。另一方面，如果反应系统中还存在着一种能以被测酶的产物作为底物的酶时，必须选择一种合适的测定条件，使另～种酶(即谓偶联酶)不能发挥作用，而不采用直接测定底物减少或产物增加的方法。
　　此外，在酶促反应过程中，由于产物不断的生成，使得逆向反应不断加强，或因产物对反应有抑制或激活作用，或因反应过程中可能有部分酶的失活，或因某些杂质的干扰，可使反应复杂化。所以测定酶活性要测定反应初速度，通常以底物的浓度变化在起始浓度5％以内的速度为初速度。同时要求底物浓度足够大，以保证整个反应速度直线进行，即临床上称为线性关系期