生物实验中的透析与超滤技术的应用

生物实验中的透析与超滤技术的应用
透析与超滤
　　透析与超滤的基础是半透膜的存在允许小的化合物(低的分子质量)流过同时阻止大的分子如蛋白质的渗透。两种方法都用于蛋白质的纯化而超滤主要用于蛋白质的浓缩。
　　透析一般用于处理掉小分子质量的污染物或换掉蛋白质溶液的缓冲液。蛋白质溶液被装在两端都密封的透析管中，然后透析管被放入更大体积的缓冲液中。小分子质量的污染物通过膜扩散到外面而大的蛋白质留在透析管中。相似的，透析管内外的缓冲液通过扩散而交换直到内外达到平衡。这个平衡是由唐南效应控制的，它保持膜两边的电中性。对于多价离子如蛋白质，这种作用意味着相反电荷的离子会与
蛋白质相互作用，溶液的离子强度不会严格地降到与本体溶液相同。对于稀释的蛋白质溶液加上表面的高的离子浓度，唐南效应是可以忽略的。但是对于高浓度蛋白质或低离子强度的缓冲液，它在离子的依数性上有很明显的作用。尽管有这些复杂的因素，透析管里的缓冲液逐渐被外面更大体积的溶液所替换。通过在规则的时间间隔内替换外面体积的缓冲液，这个过程可以很快的处理掉小分子质量的污染物或换掉蛋白质溶液的缓冲液。