荧光显微镜术的分辨率受从焦平面上下发出光线

荧光显微镜术的分辨率受从焦平面上下发出光线
共聚焦显微镜术
    荧光显微镜术的分辨率受从焦平面上下发出光线的限制，导致图像上有相当多的模糊斑点。共聚焦显微镜术预期可获得较高的轴向分辨率，就是单个细胞中心顶部或是底部的结构可以区分清楚。与常规显微镜术相反，该方法依靠的是点照明，而不是场照明。样本被一束通过小孔聚焦的激光即一个点源照亮。因此，样本上非聚焦区的点处的光强度要比常规的使用场照明时弱。然后，从样本发出的荧光聚焦在小检测孔上。即大部分非聚焦的光线被排除在最终的图像之外，这相当大程度地增加了对比度，因此获得了样本的细微结构。
当透射光线到达检测器时，彩色的电子束分裂器将激发光线反射至样本。光源到物镜的光路和物镜到检测孔的光路本质上是一样的。因此，照明和检测孔都聚焦在样本上的照明点，这就是为什么把该系统叫做“共焦”。由于被检测的信号通常十分微弱，使用的检测器是一个光电倍增管。