0.2微米微孔滤膜适于一般情况灭菌-细菌显微镜

0．2微米微孔滤膜适于一般情况灭菌-细菌显微镜
溶液的过滤除菌
    许多用于细胞培养的溶液中含有一种或多种对热不稳定的成分(如抗生素)，或几种成分构成的体系(如磷酸盐缓冲体系)，如果将它们进行高压蒸汽消毒，则会生成有毒的沉淀物。因此，使用膜滤器对这些溶液进行冷消毒是最普遍的方法。    0．2微米微孔滤膜适于一般情况灭菌；然而，一些环境应激细菌(如假单胞菌属SP．)及支原体就能够通过这类滤膜。为了能最大限度地去除这些组织培养中常见的微生物污染，就要采用孔径为0．1微米微孔滤膜过滤培养液和血清。滤膜制造商可提供不同类型的滤膜。就细胞培养而言，醋酸纤维素或硝酸纤维素滤膜通常用于过滤诸如培养液和缓冲液等液体。值得注意的是，在使用前应该用热的去离子水冲洗薄膜，清除其中可能引起细胞毒性的可溶性物质。尼龙膜含较少的表面活化剂或润湿剂等可溶性物质；聚乙烯磺酸膜中含少量的可溶性物质并很少与蛋白质结合。
    确定和控制细胞培养的微生物污染    细菌和真菌污染可以通过在有利于细菌、真菌和酵母生长的条件下直接培养而检测。同样地，检测支原体污染的直接方法也可用微生物培养基促使支原体繁殖，再进行筛查。微生物污染能够通过使用抗生素而得到控制。微生物污染的检测应列人细胞培养质量控制的常规项目。微生物和支原体的检测还应在刚收到细胞系时，为细胞库主库和运作库以及保种所准备的安瓿样本进行检查。这种检查还可以在任何时候、怀疑有污染、没有抗生素存在而细胞已经培养了几个星期的情况下进行。    注意：为了避免细胞系不小心被污染，细菌、真菌的检测应在不从事细胞培养的实验室中进行。