悬浮培养的细胞传代生物实验图像显微镜

悬浮培养的细胞传代生物实验图像显微镜
悬浮培养的细胞传代
1．每2～3天后细胞生长密集，轻轻地将悬液培养的细胞从孵育箱中取出而不要摇动  它，此时细胞沉降在瓶的底部。去掉1／3的旧液，加入等量的预热培养液。如果培  养液体积小于15ml，轻轻摇动培养瓶使细胞悬浮，然后水平放人培养箱。
2．在不需要更换培养液的培养期内，只需摇动培养瓶使细胞悬浮，观察培养液颜色的  变化，它直接显示细胞生长代谢状况。
3．当细胞生长到2．5×10的3次方个／ml时进行传代。从培养箱中取出培养瓶，摇动以重悬细  胞。将一半的细胞悬液移入一个新培养瓶中，每瓶再补加预热的培养液7～lOml，  然后放人培养箱。
1．用70％乙醇清洗血细胞计数板表面及其盖玻片，自来水轻微润湿盖玻片的边缘，并  将它紧贴在计数板的沟槽上，水平盖住银色计数区。2．对于单层贴壁生长的细胞，用胰蛋白酶消化法使细胞从壁表面分离下来。3．按需要将细胞稀释成均匀的悬液，细胞团块均需分散。4．用一支无菌的巴氏滴管取细胞悬液并将其转移至血细胞计数板计数室的边缘，用滴  管头滴一滴在计数板盖玻片的下方，使之充盈到第二个计数室。5．开始计数前将计数板静置几分钟，吸去多余的液体。用100×显微镜观看到一个大方  格状的中心区。用手握式计数器计数四角及中心小方格内的细胞数，其中压上线和  压左线的细胞包含在内。重复计数另一小室的细胞。