学显微镜中观察切片的细胞器结构变化

学显微镜中观察切片的细胞器结构变化

负增差法不仅可以用于完整的材料，而且在将材料切成切片以后也可以采用。为了得到切片的负增差，需预先用可以除去包埋物质的适当溶液处理。如果标本是包埋在甲丙塑料中的，则可将带有切片的网先放到二甲苯中浸泡30一40分钟，也可以放到丁基甲丙塑料单体中浸泡2小时。然后在每个载网上(放切片的一面)滴加一滴2％的磷钨酸溶液，滴后马上用滤幕氏将它吸去。等载网上所剩下的一薄层溶液干燥以后，标本自p可放到电子显微镜中观察。应该记住，建议使用的pH值(7．4)并不是对所有标本都是适用的。为此，可以从pH7．4开始，逐步改变pH值，以获得最佳的结果。在锇酸中固定的标本不适于进行负增差处理，因为它有很强的“正”增差。因此，标本应该用福尔马林或褐尔马林与乙醇的混合物固定。   在光学显微镜中巨甲丙塑料切片的磷究  为了观察细胞器，常常必须研究包埋在甲丙塑料中的组织块(用在电子显微镜中的)的厚切片。为此，将在超薄切片机上或用普通的刀片切下的切片放到一块涂有卵蛋白的盖片上，可以用一根细毛来转移切片(把切片放到盖片上的一滴水中之后，再将它们展平)；也可以将盖片仔细地放到漂浮在切片机刀槽中的切片下面，然后提起，～下就将切片安置到盖片上面。在安置好的切片千燥后，它会紧贴在盖片上，郎可对之进行各种操作处理。没有除去甲丙塑料的切片可以用天青B、甲苯胺蓝染色，也可以进行孕尔根(Feulgcn)反应(在多聚糖上的反应)，或用酶处理。但是将厚切片的甲丙塑料除去以后再进行染色，可以得到好得多的结果。为了达到这一目的，粘贴好了的切片应该先用甲苯处理5分钟，然后通过乙醇和水，用铬矾的槽菁青溶液染色。