细胞组分的实验显微镜-蛋白质及小的细胞溶质颗粒

  作者:厂家库小编WEX    2020-03-06    阅读:313

细胞组分的实验显微镜-蛋白质及小的细胞溶质颗粒
  分离细胞的主要亚细胞组分包括:①致密细胞器,如线粒体、细胞核和溶酶体;②膜系统,包括细胞膜、高尔基复合体和内质网;③细胞骨架结构;④蛋白质及小的细胞溶质颗粒。组织的四种主要类型是上皮组织、结缔组织、肌肉组织和神经组织。所有组织都含有组成其功能单位的特殊细胞类型。毗邻细胞之间,以及细胞与细胞外基质或者基底膜之间的结构和化学黏附机制维持着组织的完整性。细胞由多种特异连接复合体连接在一起,这些复合体涉及到不同的细胞骨架微丝和不同家族的细胞黏附分子,包括二价阳离子依赖的钙黏素和黏附素(M92+和Ca2+)。组织的裂解过程要求破坏细胞间的黏附并对细胞的伤害最小。因为分离过程本身有损细胞的完整性和功能,所以为保障分离的细胞具有完整细胞活力和功能,必须优化针对特异细胞组分的分离条件。
  其次,研究亚细胞组分的实验结果的可靠性依赖于获得这些组分的分离细胞的质量。用于分离单一细胞的方法一定要能维持群体的活力和代谢活性;用于关联结果的一条定量基线和实验组内结果比较是非常必要的。细胞数、细胞活力和蛋白质含量的检测可以提供这个基线。
  实体组织,包括血液、胸和腹渗出液在内的生物液体和细胞系都是分离细胞的潜在来源。从新鲜组织来的细胞可能是异质性的,因此需要鉴别细胞的方法。建议确认从细胞系分离出的细胞类型。
  不同组织的结构异质性妨碍了使用同一种方法分离细胞。尽管组织特异性的分离方法具有一些共同特征,例如使用机械方法将组织打散为小块,及使用酶消化支撑基质以释放单细胞。可以通过改变酶的种类、酶的浓度、消化时间和温度,来优化从不同组织获得单细胞的方法。
  但从细胞培养需要维持细胞的代谢和增殖功能的角度来看,它们都是相关的。移植培养用于细胞数量很少的细胞群,需要扩增细胞的数量。
  这里仅提供了用于分离人卵巢癌组织细胞的实验方案,而没有提供适用于各种特异组织的不同实验方案。这些肿瘤的特点迥异,需要许多实验技术去完成,这就为机械法和酶消化法分离细胞提供了一个出发点。实验方案适用于不同类型的组织,也可以作为建立最优分离条件的基础。

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