细胞通过冷冻和在液氮中储存,可被长期保存

  作者:厂家库小编CJK    2020-03-06    阅读:572

细胞通过冷冻和在液氮中储存,可被长期保存
  冷藏 
  通过冷冻和在液氮中储存,细胞可被长期保存。影响细胞冻存成功与否的重要因素包括冻存速率、冷冻保护剂的类型和浓度及细胞浓度。尽管采用程序控制的细胞冷冻仪能取得最佳的效果,但使用其他方法也可控制冻存速率。例如采用一个厚壁的聚苯乙烯盒,放置于一80℃冰箱中,或放在一个可放人液氮细胞库颈口的特殊装置中,将细胞保持在气相中,使其慢慢降温。然而这些方法不能像程序降温仪那样在冻存细胞复苏时获得较高的存活率。避免细胞内冰晶的形成很关键,可以通过以下几种方法将其发生率减到最低,包括加入冷冻保护剂[如二甲基亚砜或者甘油]、增大血清浓度、大量的细胞数和缓慢降温。对于大多数哺乳类动物细胞,最适降温速率为一1℃/min。最常用的冷冻保护剂是10%(体积分数)二甲基亚砜,这里的实验方案概括性地描述了它的用法,但对于某些细胞它可能是有毒的(注:二甲基亚砜是一种极性溶剂,可与溶解其中的任何物质一起渗透人体皮肤,处理二甲基亚砜时要小心,并戴上防护手套)。
  细胞复苏方法也很关键,应避免渗透冲击。冻存细胞应快速融化至37℃,在培养基中缓慢稀释。

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