体积排阻层析技术(凝胶过滤)测定分子质量

  作者:厂家库小编FAyw    2020-03-06    阅读:252

体积排阻层析技术(凝胶过滤)测定分子质量
    体积排阻层析法(凝胶过滤)测定分子质量    体积排阻层析(SEC)是测定蛋白质分子质量的常用方法之一。凝胶过滤是体积排阻层析的一种,用水作流动相,而体积排阻层析的流动相既可以是水也可以是其他溶剂。层析用的支持物或凝胶溶胀后形成多孔颗粒,溶质分子的洗脱由于分子质量小的物质可渗人多孔颗粒的内部,受到的阻滞作用大,流程长;而较大的分子,根据体积大小而排阻在多孔颗粒的外面,所以大分子优先于小分子被洗脱出来。
      管底穿刺蠕动洗脱分离法    尽管大量的层流使区带扩展,但是蠕动洗脱技术因具有全自动、使用简便、仪器普通、速度快和相对容易安装的特点而被广泛应用。添加材料(其他材料见基本方案2)待洗脱的梯度管(见基本方案l或备择方案1)模仿梯度(与样本所用梯度相同)蠕动泵带有收集管的部分收集器(12mmX 75mm管或1.5ml微量离心管)玻璃微孔毛细吸量管微孔管中央有孔的离心管帽离心管架1.将蠕动泵与带有微量试管的部分收集器按顺序连接起来。用与实验中所用溶液成分  相同的模拟梯度测定泵速,使液体从出口以0.5~lml/min的速度缓慢流出。将全部  梯度洗脱入指定的编号试管中,测量所需组分的体积。准备带有适当数量试管的部  分收集器,多准备些试管以防收集器出现问题。

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