细菌、真菌和酵母生长条件下直接培养显微镜检测

细菌、真菌和酵母生长条件下直接培养显微镜检测
确定和控制细胞培养的微生物污染
　　细菌和真菌污染可以通过在有利于细菌、真菌和酵母生长的条件下直接培养而检测。同样地，检测支原体污染的直接方法也可用微生物培养基促使支原体繁殖，再进行筛查。微生物污染能够通过使用抗生素而得到控制。微生物污染的检测应列人细胞培养质量控制的常规项目。微生物和支原体的检测还应在刚收到细胞系时，为细胞库主库和运作库以及保种所准备的安瓿样本进行检查。这种检查还可以在任何时候、怀疑有污染、没有抗生素存在而细胞已经培养了几个星期的情况下进行。
　　细胞的能动性
　　真核细胞运动和对周围环境作出反应的能力是细胞形态发生的关键，也是肿瘤细胞侵袭的基础。大多数细胞具有向化学吸引剂迁移的能力。在趋化运动方面，细胞须能辨认化学梯度的方向，使自己朝向化学梯度做定向运动。调节细胞趋化运动的过程较复杂，包括伸出伪足、附着于底物和解除原有附着等。
　　正常情况下，示踪大分子物质不能进入细胞内。细胞修复时，细胞内含有示踪物质。最适合用于研究细胞动力学的细胞是盘基网柄菌属阿米巴虫，这类细胞以分散形式生长，但饥饿时很快聚集成簇，形成多细胞结构。在聚集成簇过程中，阿米巴表现趋化运动、信号转导、细胞膜波动、吞噬和分裂等一系列不同行为。以便研究野生型细胞和基因修饰细胞系的能动性和趋化性行为。真核细胞趋化实验
　　趋化是指细胞沿化学梯度定向运动的倾向，有助于细胞做变形运动和在炎症部位聚集。策略设计
　　细胞根据趋化受体与化学吸引剂结合的变化探测化学吸引剂浓度的变化。化学梯度最陡和吸引剂浓度稍低于与受体结合呈饱和状态时，趋化剂与受体结合的变化最大。化学梯度按一定坡度呈直线形上升(如趋化剂浓度升高lo倍，坡度超过1 mm)时，稍低于受体Ka的化学吸引剂浓度(该浓度使1／2受体被结合)，引起的细胞趋化较理想。因为化学梯度的几何曲线在不同实验是不同的，所以在合适浓度范围内需要达到较陡梯度的浓度也不同。在细胞迁移的整个过程中，梯度取决于合适浓度和梯度坡度。
　　恰当的实验体系选择受下列4个因素影响：①被研究细胞的运动速率；②实验目的(鉴定一种因子是否具有趋化性或评价趋化机制)；③完成实验的恰当时间；④细胞和化学吸引剂的可靠性(实验取决于细胞数目和化学吸引剂总量