应用显微镜观察到单细胞的朝向和定向迁移

应用显微镜观察到单细胞的朝向和定向迁移
滤膜趋化实验
　　实验前需适当选择：①细胞培养皿(如Neuro Probe公司生产的盲孔培养皿或多孔培养皿，也可选用带有滤膜嵌套的24孔培养板)；②滤膜(较厚的纤维素硝酸盐或较薄的聚碳酸盐)；③滤膜孔径大小；④滤膜表面包被(根据实验细胞类型)。通过下列检测使细胞迁移定量：①细胞迁移入滤膜的距离；②贴于滤膜底面的细胞数；③穿经滤膜和掉人下池的细胞数。如果一种因子引起细胞迁移增强，需进行其他实验以确定是否由随机迁移(化学促进作用)或向试剂定向运动(趋化作用)，或两种协同作用引起的。将待测物注入滤膜的上方和下方，按一系列均一(各向同性的)浓度检测细胞迁移，以此可观察化学促进作用。
 计算化学吸引系数和趋化系数。　　因大多数化学吸引剂呈剂量依赖性刺激细胞运动，故需仔细分析，鉴别化学吸引剂刺激引起的运动(化学促进作用)和定向运动(趋化作用)。解决方法是，通过观察同一部位化学吸引剂(掺入琼脂糖)在不同浓度情况下对于细胞迁移的作用，检测化学吸引剂刺激引起的运动。根据测量数据可计算化学促进系数，而化学促进系数可用于评价化学促进和趋化作用对于细胞以化学吸引梯度形式迁移的相对作用。通过用录像显微镜观察细胞迁移，可观察到单细胞的朝向和定向迁移。对于已固定细胞，有研究者以细胞核是否朝向确定细胞是否朝向化学吸引源。